加入收藏
百奥莱博公司客服电话百奥莱博QQ百奥莱博QQ百奥莱博QQ
百奥莱博公司微信服务号

产品目录

ONPG图片
产品货号:
LA14555
中文名称:
ONPG
英文名称:
2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside
产品规格:
1g|5g
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
ONPG是一种比色和分光光度计底物,用于检测β-半乳糖苷酶活性。


中文名称邻硝基苯-β-D-半乳糖苷
英文名称2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside
CAS号369-07-3
分子式C12H15NO8
分子量301.25
结构式ONPG
外观类白色结晶性粉末
熔点180~190℃(lit.)(dec.)
溶解性溶于水
密度1.60g/cm3 (预测)
含量>99%
储存条件2~8℃,避光防潮密闭干燥



β-galactosidase,将乳糖分解成半乳糖和葡萄糖。β-Galactosidase乳糖不具体,并将其作为一个简单的半乳糖苷。2-Nitrophenylβ-D-galactopyranoside水解导致半乳糖的释放和一个黄色的发色的化合物。试验底物不依赖诱导或本构渗透酶进入细胞,因此反应迅速,24小时内发生。
该酶对ONPG具有较高的水解能力(100%),对天然底物乳糖具有中等活性(25.7%)。然而,该酶对所有其它显色硝基苯基类似物的水解能力很弱,表明Gal308是具有窄底物特异性的β-半乳糖苷酶。为了研究重组酶的动力学参数,测定了Gal308对ONPG和乳糖的Michaelis-Menten常数(Km)、周转数(kcat)和催化效率(kcat/Km)。Kcat和Km值ONPG分别为464.7±7.8s-1和2.7±0.3mM,乳糖分别为264.2±2.1s-1和7.1±0.8mM。ONPG(172.1s-1mM-1)的kcat/Km值比乳糖(37.2s-1mM-1)高4.6倍,表明Gal308对ONPG的催化效率明显高于乳糖。


科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。用于检测β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)活性,是β-半乳糖苷酶的显色底物。经β-半乳糖苷酶催化后可产生黄色产物,在410~420nm波长可以检测吸光度


激酶实验本实验采用ONPG和乳糖两种底物测定β-半乳糖苷酶活性。通过跟踪ONPG释放出的邻硝基苯酚的量来测定ONPG的β-半乳糖苷酶活性。反应混合物由100μL的酶溶液和400μL的ONPG溶液(在pH6.8的100mM Tris-HCl缓冲液中为2.5g/L)组成。在78℃孵育15分钟后,加入等体积的1M Na2CO3终止反应。通过测定A405,定量测定释放的邻硝基苯酚。一个活性单位是在测定条件下每分钟产生1μmol邻硝基苯酚所需的酶量。特异性活性以每毫克蛋白质单位表示。在含有100μL酶溶液和5%乳糖的同一缓冲液中测定对乳糖的活性,通过沸腾10分钟停止反应,并使用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶测定试剂盒测定葡萄糖的浓度。通过测定A492对释放的葡萄糖进行定量测定。一个酶活性单位被定义为每分钟释放1μmol葡萄糖所需的酶活性量。

相关搜索:ONPG邻硝基苯-β-D-半乳糖苷2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside369-07-3
首页 |  关于我们 |  联系我们 |  在线咨询 |  网站地图
北京百奥莱博科技有限公司 京ICP备14007103号-3